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一、技術(shù)簡介CLIP(Cross-linkingimmunoprecipitation，交聯(lián)免疫共沉淀）通過結(jié)合UV交聯(lián)和免疫共沉淀的方法來分析蛋白與RNA相互作用的結(jié)合位點(diǎn)。二、技術(shù)原理CLIP技術(shù)利用紫外線照射使細(xì)胞內(nèi)的RNA與RNA結(jié)合蛋白（RBP）發(fā)生共價交聯(lián)，隨后通過免疫沉淀的方法富集與特定RBP結(jié)合的RNA片段，再經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄和高通量測序等步驟，獲取RBP在體內(nèi)的RNA結(jié)合位點(diǎn)和結(jié)合序列信息。三、應(yīng)用場景1.蛋白質(zhì)-RNA相互作用研究：確定特定蛋白質(zhì)在體內(nèi)的RNA結(jié)...

一、技術(shù)簡介RIP（RNAImmunoprecipitation，RNA免疫沉淀）技術(shù)是一種用于研究細(xì)胞內(nèi)RNA與蛋白質(zhì)相互作用的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)方法，能夠揭示RNA結(jié)合蛋白（RBP）在轉(zhuǎn)錄后調(diào)控中的功能機(jī)制。二、技術(shù)原理RIP利用針對目標(biāo)蛋白的抗體把相應(yīng)的RNA-蛋白復(fù)合物沉淀下來，通過分離純化，對結(jié)合在復(fù)合物上的RNA進(jìn)行RT-PCR驗(yàn)證或測序分析，結(jié)果更具生物學(xué)說服力。三、應(yīng)用場景1.基礎(chǔ)機(jī)制：解析RNA結(jié)合蛋白（如AGO2、Polycomb復(fù)合物）的功能及RNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。2....

一、技術(shù)簡介ChIP（染色質(zhì)免疫共沉淀）是一種研究蛋白質(zhì)與DNA相互作用的關(guān)鍵技術(shù)，廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)鑒定、表觀遺傳修飾分析等領(lǐng)域。二、技術(shù)原理利用抗原抗體的特異性結(jié)合，將與目的蛋白相結(jié)合的DNA片段沉淀下來，能夠真實(shí)地反映結(jié)合在DNA序列上的調(diào)控蛋白。三、應(yīng)用場景1.轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究：鑒定轉(zhuǎn)錄因子（如p53、NF-κB）的DNA結(jié)合位點(diǎn)。2.表觀遺傳學(xué)：分析組蛋白修飾（如H3K27me3）在基因沉默中的作用。3.疾病機(jī)制：探索癌癥中異常蛋白（如MYC）的基因組結(jié)合模式。...

一、技術(shù)簡介IP（免疫沉淀，Immunoprecipitation）和Co-IP（免疫共沉淀，Co-Immunoprecipitation）是研究蛋白質(zhì)功能及相互作用的核心技術(shù)，廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域。二、技術(shù)原理IP通過特異性抗體與目標(biāo)蛋白結(jié)合，利用抗體將靶標(biāo)蛋白（即抗原）分離出來，從而檢測某一種蛋白的表達(dá)情況；而CO-IP是在IP基礎(chǔ)上，驗(yàn)證蛋白質(zhì)間的相互作用。通過捕獲一個蛋白（誘餌蛋白），檢測與其結(jié)合的互作蛋白（靶蛋白），從而特異性富集所研究的目的蛋白，進(jìn)...

在細(xì)胞生物學(xué)研究、生物制藥等前沿領(lǐng)域，細(xì)胞培養(yǎng)基為細(xì)胞生長繁衍提供關(guān)鍵養(yǎng)分與適宜環(huán)境。掌握其正確使用方法，才能讓細(xì)胞蓬勃生長，助力科研突破與產(chǎn)業(yè)革新。開啟培養(yǎng)前，依據(jù)細(xì)胞種類、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮Y選培養(yǎng)基，如貼壁生長的癌細(xì)胞系多用含血清、葡萄糖、氨基酸及多種生長因子的RPMI-1640培養(yǎng)基；原代細(xì)胞培養(yǎng)常選營養(yǎng)成分豐富、成分貼近體內(nèi)環(huán)境的DMEM培養(yǎng)基，且需添加適量抗生素，像青霉素、鏈霉素，防止微生物“偷襲”，搭建安全“保育箱”。配制環(huán)節(jié)嚴(yán)格按說明書稱取培養(yǎng)基粉末，溶解于超純水中，用...

原代心肌細(xì)胞間質(zhì)并非單一物質(zhì)，而是由多種成分巧妙交織而成的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。其中，膠原蛋白是極為重要的組成部分。它如同堅韌的繩索，為心肌細(xì)胞提供穩(wěn)固的支撐框架。在心臟每一次有力的搏動中，膠原蛋白承受著巨大的機(jī)械應(yīng)力，確保心肌細(xì)胞不會因過度拉伸或扭曲而受損，維持著心臟結(jié)構(gòu)的完整性，使其能夠在漫長的生命周期中持續(xù)穩(wěn)定地工作。彈性纖維也在其中扮演著重要角色。它們賦予心肌組織一定的彈性和回縮力。當(dāng)心臟收縮時，彈性纖維被拉伸儲存能量；而當(dāng)心臟舒張時，又能釋放能量輔助心臟恢復(fù)到原來的形狀，讓心臟...

在生命科學(xué)的微觀世界里，細(xì)胞凋亡檢測對剖析疾病機(jī)理、研發(fā)藥物至關(guān)重要。諸多檢測方法各展其長，共同揭開凋亡神秘面紗。形態(tài)學(xué)觀察是基礎(chǔ)“視窗”。光學(xué)顯微鏡下，經(jīng)特定染色（如吉姆薩染色），凋亡細(xì)胞體積縮小、核質(zhì)濃縮，與周圍正常細(xì)胞形成鮮明對比；熒光顯微鏡利用霍echst等染料，讓凋亡細(xì)胞核亮起藍(lán)白熒光，呈致密塊狀或碎片狀，直觀呈現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)異變，為初步判斷提供依據(jù)。電子顯微鏡則更進(jìn)一步，超高倍放大下，清晰可見凋亡細(xì)胞膜出芽、氣泡狀結(jié)構(gòu)，線粒體腫脹皺縮，從細(xì)微處洞察凋亡特征。生化檢測聚...

在生命科學(xué)與醫(yī)學(xué)研究的廣袤領(lǐng)域中，耐藥細(xì)胞株的建立吸引著眾多科研工作者深入探尋。這一過程不僅涉及復(fù)雜的細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制，更關(guān)乎對疾病本質(zhì)的深刻理解以及新藥研發(fā)的希望曙光。耐藥細(xì)胞株的建立往往始于對特定藥物敏感的細(xì)胞群體。這些細(xì)胞在適宜的培養(yǎng)環(huán)境下生長繁殖，如同一個訓(xùn)練有素的軍團(tuán)，遵循著既定的生命規(guī)律。然而，當(dāng)持續(xù)暴露于逐漸增加濃度的藥物環(huán)境中時，藥物如同洶涌的潮水，不斷沖擊著細(xì)胞的生存防線，而細(xì)胞則在這場生存挑戰(zhàn)中開始發(fā)生微妙的變化。起初，部分細(xì)胞憑借自身固有的一些隨機(jī)突變或特...

在生命科學(xué)的浩瀚海洋中，細(xì)胞作為生命的基本單元，承載著無盡的奧秘與可能。為了深入探索這些微小世界的規(guī)律，科學(xué)家們常常需要對特定的細(xì)胞進(jìn)行追蹤、觀察和研究。此時，標(biāo)記細(xì)胞株便成為了他們手中的“精準(zhǔn)指南針”。這是通過特定的方法將某種標(biāo)記物引入細(xì)胞株中，使其能夠被準(zhǔn)確地識別和追蹤。這種標(biāo)記物可以是熒光蛋白、抗體、磁性微粒等，它們各自具有性質(zhì)和優(yōu)勢，能夠滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。細(xì)胞株的作用首先體現(xiàn)在細(xì)胞追蹤與定位上。在復(fù)雜的生物體內(nèi)或細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中，特定細(xì)胞的行蹤往往是科研人員關(guān)注的焦點(diǎn)。...

在醫(yī)學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，耐藥細(xì)胞株的出現(xiàn)無疑是一個令人矚目的挑戰(zhàn)。這些細(xì)胞株因長期暴露于藥物環(huán)境中而逐漸產(chǎn)生了對藥物的耐受性，使得原本有效的藥物在它們面前失去了威力，為疾病的治療帶來了重重困難。耐藥細(xì)胞株的形成是一個復(fù)雜而多樣的過程。細(xì)胞在藥物的持續(xù)壓力下，可能通過基因突變、基因表達(dá)改變、藥物外排泵的激活等多種機(jī)制，逐漸獲得了對藥物的抗性。這些耐藥細(xì)胞不僅能夠在藥物存在的環(huán)境中存活，甚至還能增殖，將耐藥性傳遞給后代細(xì)胞，從而形成穩(wěn)定的耐藥細(xì)胞株。這種耐藥性的出現(xiàn)，往往與藥物...

原代細(xì)胞的應(yīng)用領(lǐng)域廣泛，主要包括以下幾個方面：一、基礎(chǔ)研究1、分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究：原代細(xì)胞保留了體內(nèi)原始組織的生物學(xué)特征，如生長和衰老等特性，是研究基因功能、蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株（系）研究、DNA、RNA和遺傳學(xué)研究等的理想模型，可幫助科學(xué)家更準(zhǔn)確地了解細(xì)胞在生理狀態(tài)下的分子機(jī)制和生命活動規(guī)律。2、疾病機(jī)理研究：通過原代細(xì)胞建立的疾病模型，能夠更好地模擬疾病的發(fā)生發(fā)展過程，有助于深入研究疾病的發(fā)病機(jī)制。例如，利用原代肝細(xì)胞研究肝炎、肝硬化等肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制；...

細(xì)胞培養(yǎng)基的主要類型包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基、無血清培養(yǎng)基以及化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基等。以下是這些培養(yǎng)基類型的具體介紹：1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基定義與特點(diǎn)：基礎(chǔ)培養(yǎng)基是一種合成培養(yǎng)基，其成分模仿天然培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分，通過化學(xué)物質(zhì)模擬合成。這類培養(yǎng)基通常含有氨基酸、碳水化合物、無機(jī)鹽、維生素及其他輔助成分。適用細(xì)胞類型：基礎(chǔ)培養(yǎng)基適用于多種已建立的細(xì)胞系和不同地方的哺乳動物細(xì)胞類型的培養(yǎng)。。2、無血清培養(yǎng)基定義與特點(diǎn)：無血清培養(yǎng)基不含動物源成分，旨在支持體外細(xì)胞的生長和維持，而無需補(bǔ)充血清。這類培...